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PCR實驗室設計的區域劃分

文章出處:技術支持|閱讀量:1267|發表時間:2020-07-27

PCR實驗室設計必須做好區域劃分,具體來說可以把PCR實驗室劃分為4個區域,即:試劑貯存和準備區、標本制備區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產物分析區。

先來簡單介紹一下PCR實驗室,這種實驗室又叫“基因擴增實驗室”。所謂“PCR”,簡單來說就是“Polymerase Chain Reaction”的簡稱,意思是聚合酶鏈式反應。

PCR是一種分子生物學技術,通過這項技術能夠放大特定的DNA片段,就好像是生物體外的特殊DNA復制一樣。通過PCR實驗室的實驗,就能夠迅速掌握待檢品中的病毒含量,其精確度高達納米級別。

PCR實驗室設計的區域劃分

1.試劑貯存和準備區:此區域的作用是貯存試劑的制備、試劑的分裝、主反應混合液的制備。注意事項是實驗項目所使用的材料,如試劑與試劑原材料,標本與標本原材料等,這些都必須存放于本區內。至于是否需要控制氣流壓力,本區倒是沒有嚴格要求。

2.標本制備區:此區域的作用是臨床標本的保存、核酸(RNA與DNA)的提取與貯存、核酸加入至擴增反應管和測定RNA時DNA的合成。注意事項是為了防止鄰近區域的空氣進入本區,壓力梯度對比鄰近區域要設置成正壓。進行實驗項目的操作時,工作人員要避免不必要的走動,以防止加樣操作中發生氣溶膠污染。

3.擴增反應混合物配制和擴增區:此區域的作用是DNA擴增、把制備的實驗試劑做成反應混合液。注意事項是實驗擴增的污染指數比較高,壓力梯度對比鄰近區域要設置成負壓,這樣做的好處是能有效防止氣溶膠從本區泄漏。

4.擴增產物分析區:此區域的作用是測定相關擴增片段。注意事項是實驗室設計時如果已經預設了全自動封閉分析儀器,那么就沒有必要再劃分本區了。本區的壓力梯度對比鄰近區域要設置成負壓,這樣做的好處是能有效防止擴增產物擴散至其它區域。

PCR實驗室設計除了要做好區域劃分外,完備的配套設施也是必不可缺的。這么說吧,它是保證實驗工作的必要條件,但要根據實驗內容來配備相應的設備和儀器,如超凈工作臺、生物安全柜、離心機、加樣器等。

上文介紹了PCR實驗室設計的區域劃分,如果還想了解更多關于實驗室設計方面的知識,請點擊“技術支持”,相信會對你有所幫助的。

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